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實驗動物免疫方法

發布日期:2024-04-03 17:26:20   瀏覽量 :63
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1. 抗原選擇:

在實驗中,可以使用蛋白質、多肽、細胞器、細胞和組織等作為抗原。根據不同的實驗需要,選擇合適的抗原進行免疫。

2. 免疫方式:

根據實驗要求,可以采用皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等方式進行免疫。根據動物的種類以及免疫物質的大小,選擇適合的注射方式。

3. 注射劑量:

根據免疫物質的大小和動物的種類,注射的劑量有所不同。下面是一個典型的注射劑量表,單位為微克(μg)。

>18-20kDa <18-20kDa

動物 抗原量 最佳抗原量 抗原量 最佳抗原量

兔子 20-200 100 50-400 200

小鼠 2-40 15 4-60 40

大鼠 10-50 30 20-150 50

綿羊 100-1000 200 200-1000 400

母雞 20-200 100 50-400 200

4. 注意事項:

- 初次免疫時,使用完全佐劑與免疫原混合;加強免疫時使用不完全佐劑與免疫原混合。

- 采用多點、時間間隔式免疫法,確保免疫效果的穩定性和持久性。

- 如果使用細胞進行免疫,兔子每次免疫所需細胞量為2-3 x 107 cells。

- 在連續免疫完三次后,應進行ELISA檢測動物的抗體滴度。一般滴度能達到1:10,000-50,000。在處死動物前一周,應加強一次免疫。

- 如果使用小鼠免疫,可以在尾靜脈采集小量血液(約50µl),最后在取眼球時采集大量血液(約500-1000µl)。如果使用兔子進行免疫,可以在耳緣靜脈采集小量血液(約2mL),最后在心臟處采集大量血液(50-100mL)。

- 采集血液后,按血清制備的標準方法使用離心機將血清離心分離,并分裝成小份,儲存在-80°C的實驗室冰箱中。

在實驗過程中,高速離心機和離心管是必備設備,用于血清制備和離心過程。這些設備的正確使用是保證實驗質量的重要環節。

總之,實驗動物免疫方案需要根據具體實驗目的和實驗動物種類進行調整和優化。在實驗過程中,嚴格遵守操作規范,并根據實驗結果進行進一步分析和研究,以獲得準確可靠的實驗數據。


*以上內容來自網絡

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